TBE 버퍼의 특징
TBE 버퍼는 Agarose gel 전기영동시 주로 사용합니다. Agarose gel 전기영동은 TAE 버퍼나 TBE 버퍼를 사용합니다. TAE 버퍼의 조성은 여기에서 확인하세요.
TBE 버퍼는 Tris, Boric acid, EDTA로 이루어진 버퍼로, 각 재료의 앞글자를 따서 명명한 버퍼입니다. TAE 버퍼에서 Acetic acid 대신 Boric acid가 들어갔다고 생각하면 됩니다.
TBE 버퍼는 TAE 버퍼와 마찬가지로 고농도의 stock solution을 만들어 놓았다가 희석해서 사용합니다. 차이점은 TAE는 50X로 제작하여 1X로 희석해서 사용했다면 TBE는 5X로 제작하여 0.5X로 사용하는 것이 일반적입니다.
TBE 버퍼의 조성
재료 | 5X 기준 넣는양(1L) | 5X stock 농도 | 0.5X working 농도 |
Tris | 54g | 450mM | 45mM |
Boric acid | 27.5g | 450mM | 45mM |
0.5M EDTA solution (pH 8.0) | 20ml | 10mM | 1mM |
DW | up to 1L | ||
5X stock solution 1L 기준 조성 |
TBE 버퍼의 희석
5X stock solution으로 제작해서 보관했다가 사용 시 100ml에 DW 900ml을 넣어 0.5X TBE (1L 기준) 로 만들어 사용합니다.
TAE 버퍼 vs TBE 버퍼
TAE, TBE 언제 어떤 버퍼를 사용해야 하는지 궁금하시다면 아래의 기준에 따라 결정해 보시기 바랍니다.
TAE 버퍼 특징 | TBE 버퍼 특징 |
- 일반적인 DNA 회수 실험 시 사용 가능 - 큰 사이즈의 DNA 전기영동에도 사용 가능 - 버퍼의 Capa가 낮아 자주 버퍼를 갈아주어야 함 (장시간 전기영동에 부적합) |
- 작은 사이즈의 DNA 분리에 좋음 - 버퍼의 Capa가 높아 장시간 사용에 좋음 - DNA 이동성이 다소 감소될 수 있음 |
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