Western blot 10X running buffer 조성

Western blot을 위한 running buffer

Western blot을 수행하기 위해서는 running buffer가 필요합니다. 실험 조건에 따라 일부 달라지겠으나 SDS-PAGE를 수행한다고 할 때 running buffer를 어떻게 만들어야 하는지 알아보도록 하겠습니다. Running buffer는 WB을 자주 한다면 매번 만들어서 사용하기 번거로우므로 10X stock으로 만들어서 사용합니다. 

 

10X running buffer 조성

시약	분자량	넣는 양	10X stock 농도	1X working 농도
Tris base	121.14	30.3g	0.25M	0.025M
Glycine	75.07	144g	1.92M	0.192M
SDS	288.38	10g	1%	0.1%
DW		Up to 1L

 

제조 및 사용시 주의사항

• SDS가 들어있어 거품이 많이 나기 때문에 1X로 희석해서 사용할 시 주의합니다.
• Tris의 경우 실험실에서 사용하는 시약이 Tris base로 MW이 121.14가 맞는지 확인 후 위와 같이 만들어야 합니다. 만약 Tris-HCl 등의 시약을 갖고 있다면 MW이 다르기 때문에 10X stock의 농도에 맞게 넣는 양을 다시 계산하시기 바랍니다. MW에 대한 자세한 설명은 여기를 참조하세요.